C肽兴奋试验可用于评价胰岛β细胞的功能。在胰岛素依赖型糖尿病患者中，胰岛β细胞的功能显著减退，故病情较重，空腹C肽基础值低，在馒头餐兴奋下大多呈低反映或延迟反映，一小部分完全无升高反应。在非胰岛素依赖型糖尿病患者空腹C肽值比正常人高，经馒头餐兴奋后，不用胰岛素治疗者以延长型、延迟高反应和延迟低反应为多，而应用胰岛素治疗者以延迟型、延迟低反应为多，无高反应。
　　对胰岛素瘤的手术后监测方面，C肽值有其独特的作用，若手术后C肽值明显地升高则表示手术不彻底或有复发和功能性转移。
　　C肽值对于鉴别低血糖的原因也有重要意义，糖尿病伴有胰岛细胞瘤所致的低血糖，血中胰岛素升高，C肽值也升高，而外源性胰岛素过量所致的低血糖，则血胰岛素升高，C肽值降低。