1.灵敏度和特异性
1)滴定法：用0.05mol/L氢氧化钠滴定空白管和测定管，至呈持久的浅灰蓝色为止，记录滴定用去的氢氧化钠毫升数。
2)比浊法：
①于试管内加入4ml橄榄油乳剂，37℃预温5min，加入0.05ml血清，立即颠倒混合5次(切勿用力振摇)，迅速用分光光度计比浊，以 Tris缓冲液调零点，在400nm波长读取吸光度为A。
②将此管置于 37℃水浴保温10min，然后同上读取吸光度为A。
③如果酶活力很高，在保温期间，底物全部变清，则应将待测血清用Tris缓冲液作适当稀释后重新操作。
④标准曲线制作，取试管4只，分别加入橄榄油乳剂1.0、2.0、3.0及4.0ml，然后用 Tris缓冲液补充到4.0ml，相当于甘油三酯浓度分别为0.17、0.34、0.51及 0.68μmol，同上比浊，绘制标准曲线。
2. 干扰因素
1)滴定法：橄榄油乳剂质量的优劣直接影响脂肪酶测定结果的准确性。乳剂乳化颗粒的大小及血清中脂肪酶是否能与乳化颗粒充分接触是重要因素。因此，每批制备的乳剂，其正常范围也略有出入，需用正常血清测试。
2)比浊法：市售橄榄油必须用氧化铝吸附处理，去除游离脂肪酸。使用未处理的橄榄油测出的脂肪酶活力只相当于处理过橄榄油测出结果的65%左右。约有5%～7%的正常人血清与底物保温后的吸光度比保温前略有增加，因而成负值。这可能由于血清中某些异常蛋白质发生沉淀所致，例如含类风湿因子的标本常有此情况。遇有此种血清，可在血清中加入聚乙二醇6000，使终浓度达55g/L，预孵10min，使干扰物(如IgM)沉淀或解离，然后再用经此处理的标本操作即可。