检测CK-MB的方法很多，早期应用的是离子交换色谱法和电泳法，操作复杂，耗时较多，以后以免疫抑制法为主，降低了检测线，提高了临床敏感性。新一代的方法是用单克隆抗体测量CK-MB的质量，用二株抗CK-MB的单抗测定CK-MB的蛋白量，此法检测限为1ug/L，诊断急性心肌梗死较酶法更敏感、更稳定、更快(10-40min)，而且可以自动化。
　　国外从20世纪80年代初建立了多种测CK-MB酶质量的方法。应用最多的是美国Hybriteeh公司的ELISA方法，正常人在5μg/L以下，此法结果和电泳法相关良好。缺点是测定时间长达半天，只适合成批标本。近两年来应用单克隆技术制备出特异性极高的只和CK-MB作用的抗血清，已有多种试剂盒供应。最近Deerson以CK-MB≥10μg/L以及CK-MB指数≥3.0(μg/U CK×l00)为AMI诊断标准。CK-MB单克隆抗体方法简单，特异性高，是目前重点发展的方法，近来有人认为此法有助于不稳定型心绞痛的诊断，目前国内应用不多。