中文名称：血清总补体活性测定（CH50试验）
英文名称：total hemolysis completment,THC,CH50
项目介绍 ：
补体最主要的活性是溶细胞作用。特异性抗体与红细胞结合后可激活补体，导致红细胞表面形成跨膜小孔，使胞外水分渗入，引起红细胞肿胀而发生溶血。补体溶血程度与补体的活性相关，但非直线关系。在一个适当的、稳定的反应系统中，溶血反应对补体的剂量依赖呈一特殊的S形曲线。以溶血百分率为纵坐标，相应血清量为横坐标，可见在轻微溶血和接近完全溶血时，对补体量的变化不敏感。S形曲线在30%-70%之间最陡，几乎呈直线，补体量的少许变化，也会造成溶血程度的较大改变，即曲线此阶断对补体量的变化非常敏感。因此，实验常以50%溶血作为终点指标，它比100%溶血更为敏感，这一方法称为补体50%溶血实验（50% complement hemolysis），即CH50。
英文名称：total hemolysis completment,THC,CH50
项目介绍 ：
补体最主要的活性是溶细胞作用。特异性抗体与红细胞结合后可激活补体，导致红细胞表面形成跨膜小孔，使胞外水分渗入，引起红细胞肿胀而发生溶血。补体溶血程度与补体的活性相关，但非直线关系。在一个适当的、稳定的反应系统中，溶血反应对补体的剂量依赖呈一特殊的S形曲线。以溶血百分率为纵坐标，相应血清量为横坐标，可见在轻微溶血和接近完全溶血时，对补体量的变化不敏感。S形曲线在30%-70%之间最陡，几乎呈直线，补体量的少许变化，也会造成溶血程度的较大改变，即曲线此阶断对补体量的变化非常敏感。因此，实验常以50%溶血作为终点指标，它比100%溶血更为敏感，这一方法称为补体50%溶血实验（50% complement hemolysis），即CH50。
补体（Complement，C）是一组存在于人和脊椎动物血清及组织液中具有酶样活性，不耐热和功能上连续反应的糖蛋白，是抗体发挥溶血细胞作用的必要补充条件，故称为补体。补体并非单一成份，而是由补体用其调节因子和相关膜蛋白以及补体受体共同组成补体系统。补体系统广泛参与机体的抗感染防御反应，具有介导细胸溶解、调理吞噬、免疫粘附以及参与炎症反应引起机体免疫损伤等作用，是体内具有重要生物学功能的免疫效应系统和放大系统。
增高见于：自身免疫性疾病、肌无力、恶性类风湿性关节炎；感染症（如风湿热、急性肝炎等、恶性肿瘤）由于干扰素的作用，补体成分多见升高；C5、C9为急性期反应蛋白
增高见于：自身免疫性疾病、肌无力、恶性类风湿性关节炎；感染症（如风湿热、急性肝炎等、恶性肿瘤）由于干扰素的作用，补体成分多见升高；C5、C9为急性期反应蛋白
50-100U/ml
30-45U/ml（数据来源于现代实验诊断学－检验与临床第二版，刘人伟、翁心植编）
30-45U/ml（数据来源于现代实验诊断学－检验与临床第二版，刘人伟、翁心植编）
无。
无。
1.绵羊红细胞（sheep red blood cell，SRBC）自绵羊红细胞颈静脉无菌采血，注入放有玻璃珠的无菌干燥三角烧瓶中，轻轻旋摇15min，除去纤维蛋白。也可将羊血与等量或2倍量的阿氏（Alsever）液混合，既可抗凝，又适于储存。分装，4摄氏度保存，可用2-3周。实验前，取适量SRBC用生理盐水洗涤2次，第3次用缓冲液洗涤，离心弃去上清液，取比积红细胞用缓冲液配制SRBC悬液，加入20-30倍的稀释液中。在541nm波长处比浊，以吸光度为标准调整红细胞浓度。
2.溶血素 溶血素（hemolysis）即抗绵羊红细胞抗体，是以SRBC作为抗原免疫家兔所得的兔抗血清，无需进不步提纯，但试验前应先行加热56摄氏度30min或60摄氏度3min以灭活补体。
3.稀释缓冲液 磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验，ph调到7.2-7.4之间。另加适量NaCl以保持等渗，加适量活化补体必不可少的钙离子和镁离子。还可加入0.1%明胶以稳定蛋白溶液，加入0.02NaN3防腐，以利保存。
4.50%溶血标准管 作CH50试验时，应同时配制50%溶血标准管。配制方法：取2%绵羊红细胞悬液0.5ml，加2.0ml蒸馏水，将SRBC全部溶解，再加入1.8%NaCl溶液2.0ml较正为等渗溶液，最后加入2%SRBC悬液0.5ml，即为50%溶血悬液，混匀后取此液2.5ml，随试验一起温育。
5.取新鲜血清标本，在各管中加入血清与试剂，一并置37摄氏度水浴箱中温育30min。温育后各管2500r/min离心5min，仔细观察比较，选择溶血程度与标准管最为相近的两管，在分光光度计上分别读取OD541值，以最接近标准管OD值的一管定为最高有效反应管。按下列公式求50%溶血的总补体值。
CH50（U/ml）=（1/血清用量）*稀释倍数
CH50试验测定经典途径总补体溶血活性，所反应的是补体9种成份的综合水平。方法简单、快速，但敏感性较低，补体的溶血活性除与试验中反应体积成反比外，还与反应所用缓冲液的PH值、离子强度、钙镁浓度、绵羊红细胞数量和反应温度有一定关系。缓冲液PH和离子强度增高，补体活性下降，钙、镁离子虽可稳定溶血系统，但过量则反应抑制溶血反应，故实验时反应的各个环节应严加控制，统一步骤。
2.溶血素 溶血素（hemolysis）即抗绵羊红细胞抗体，是以SRBC作为抗原免疫家兔所得的兔抗血清，无需进不步提纯，但试验前应先行加热56摄氏度30min或60摄氏度3min以灭活补体。
3.稀释缓冲液 磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验，ph调到7.2-7.4之间。另加适量NaCl以保持等渗，加适量活化补体必不可少的钙离子和镁离子。还可加入0.1%明胶以稳定蛋白溶液，加入0.02NaN3防腐，以利保存。
4.50%溶血标准管 作CH50试验时，应同时配制50%溶血标准管。配制方法：取2%绵羊红细胞悬液0.5ml，加2.0ml蒸馏水，将SRBC全部溶解，再加入1.8%NaCl溶液2.0ml较正为等渗溶液，最后加入2%SRBC悬液0.5ml，即为50%溶血悬液，混匀后取此液2.5ml，随试验一起温育。
5.取新鲜血清标本，在各管中加入血清与试剂，一并置37摄氏度水浴箱中温育30min。温育后各管2500r/min离心5min，仔细观察比较，选择溶血程度与标准管最为相近的两管，在分光光度计上分别读取OD541值，以最接近标准管OD值的一管定为最高有效反应管。按下列公式求50%溶血的总补体值。
CH50（U/ml）=（1/血清用量）*稀释倍数
CH50试验测定经典途径总补体溶血活性，所反应的是补体9种成份的综合水平。方法简单、快速，但敏感性较低，补体的溶血活性除与试验中反应体积成反比外，还与反应所用缓冲液的PH值、离子强度、钙镁浓度、绵羊红细胞数量和反应温度有一定关系。缓冲液PH和离子强度增高，补体活性下降，钙、镁离子虽可稳定溶血系统，但过量则反应抑制溶血反应，故实验时反应的各个环节应严加控制，统一步骤。
无特殊要求。
静脉血3~5ml或红帽真空管采血，尽快分离血清和进行测定，不能立即测定时血清-80℃保存。
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