1.灵敏度和特异性
（1）凯氏定氮法
　　历史悠久，它是根据蛋白质平均含氮量16%来计算蛋白质浓度的。结果准确，但方法复杂。
（2)双缩脲法
　　蛋白质中的肽键在碱性环境中能与铜离子作用产生紫红色络合物。此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性环境中与铜离子作用产生紫红色络合物的反应相似，故称为双缩脲反应。
　　简单、精密、准确，为临床首选的常规方法，但灵敏度稍差。手工和自动化都可，已被推荐为测定血清总蛋白的参考方法。
　　优点：干扰少，试剂稳定，操作简便、快速。
　　缺点：灵敏度较低
（3）酚试剂法
　　运用蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基能还原磷钨酸-磷钼酸试剂生成钼蓝来测定蛋白质的浓度。
　　改良法：在酚试剂中加入碱性铜离子。集中了双缩脲法和酚试剂法的优点，灵敏度高，但受许多还原物质的干扰，限制了它在临床上的应用。
（4）紫外分光光度法
　　蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处有一吸收峰，可用于蛋白质含量的测定。
　　准确性差，但因未加任何试剂和处理，可保留其生物活性且可回收全部蛋白质，故可用于较纯的酶和免疫球蛋白测定。
（5）染料结合法
　　在酸性环境下，蛋白质分子带正电，可与带负电的染料结合产生颜色而测定之。
　　 重复性好、灵敏度高，BCG 法特异性不高。
（6）比浊法
　　某些酸（如三氯醋酸、磺基水杨酸）能与蛋白质结合产生微细沉淀，测定悬浮液的浊度即可求得蛋白质的含量。
　　简单、试剂易得，但影响因素太多。
2.干扰因素
　　以下因素会影响检测结果：①激烈运动后数小时内血清总蛋白浓度可增高4-8g/L。②卧位比直立时总蛋白浓度低3-5g/L。③溶血标本中的血红蛋白每存在1g/L可引起总蛋白测定值增加约3%。④含脂类极多的乳糜标本需进行预处理，以消除测定干扰。