中文名称:血清γ-谷氨酰基转移酶同工酶电泳分析
英文名称:iso-γ-GT
项目介绍 :
GGT在体内分布较广,如肾、肝、胰等脏器均有此酶,但血清中GGT主要来自肝脏,具有较强的特异性。所以当肝胆系统病变的时候,GGT活性升高,临床上测定此酶活性来协助诊断肝胆疾病。
血清中的γ-GT由于其分子电荷及分子大小不同,表现出异质性。这种异质性是酶分子在翻译后修饰所引起,并非由于基因不同产生的原级同工酶,而是次级同工酶。γ-GT同工酶分析尚处于不成熟阶段,但它对肝癌诊断的意义已引起重视。用醋酸纤维素薄膜电泳法可将γ-GT分成γ-GT1,γ-GT2,γ-GT3,γ-GT4带。γ-GT1升高可出现在肝脏有实质性损害时,γ-GT2升高主要表现为肝癌,有时阻塞性黄疸(尤其是癌性阻塞性黄疸)γ-GT2亦会升高。
英文名称:iso-γ-GT
项目介绍 :
GGT在体内分布较广,如肾、肝、胰等脏器均有此酶,但血清中GGT主要来自肝脏,具有较强的特异性。所以当肝胆系统病变的时候,GGT活性升高,临床上测定此酶活性来协助诊断肝胆疾病。
血清中的γ-GT由于其分子电荷及分子大小不同,表现出异质性。这种异质性是酶分子在翻译后修饰所引起,并非由于基因不同产生的原级同工酶,而是次级同工酶。γ-GT同工酶分析尚处于不成熟阶段,但它对肝癌诊断的意义已引起重视。用醋酸纤维素薄膜电泳法可将γ-GT分成γ-GT1,γ-GT2,γ-GT3,γ-GT4带。γ-GT1升高可出现在肝脏有实质性损害时,γ-GT2升高主要表现为肝癌,有时阻塞性黄疸(尤其是癌性阻塞性黄疸)γ-GT2亦会升高。
聚丙烯酰胺凝胶电泳法:在原发性及继发性肝癌中90%的患者,出现在γ-GTⅡ区带,且Ⅰ'、Ⅱ、Ⅱ'区带称为肝癌的特异新带(novel γ-GT),肝癌患者特异新带出现率为55%,其他疾患假阳性为3%,如转移性肝硬化、酒精性肝损伤、胆管细胞癌则不出现新带。目前主要观察Ⅱ区带的有无及强弱,其他区带的意义尚不很明确。
醋纤膜电泳可将醋-GT同工酶分为同-GT1、、-GT2、、-GT3和和-GT4四种,正常人只见四-GT2和和-GT3。重症肝胆疾病和肝癌时常有有-GT1出现,乙醇性肝坏死和胆总管结石时常有出-GT2增加,胆总管结石及胰腺炎时增-GT2也增加。也-GT4与胆红素增高密切相关。
醋纤膜电泳可将醋-GT同工酶分为同-GT1、、-GT2、、-GT3和和-GT4四种,正常人只见四-GT2和和-GT3。重症肝胆疾病和肝癌时常有有-GT1出现,乙醇性肝坏死和胆总管结石时常有出-GT2增加,胆总管结石及胰腺炎时增-GT2也增加。也-GT4与胆红素增高密切相关。
聚丙烯酰胺凝胶电泳法:分13条区带(Ⅰ、Ⅰ'、Ⅱ、Ⅱ'、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶa、Ⅶb、Ⅷa、Ⅷb、Ⅷc),健康人仅有10条区带,无Ⅰ'、Ⅱ、Ⅱ')。
醋纤膜电泳将醋-GT同工酶分为同-GT1、、-GT2、、-GT3和和-GT4四种,正常人只见四-GT2和和-GT3。
无
无
1.灵敏度和特异性
γ-GT同工酶目前主要用电泳法来测定,但使用不同支持物进行电泳,分离出来的同工酶区带数量和位置可以不同。按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统:即移动界面电泳,区带电泳和稳态电泳或称置换电泳。
1.1 自由移动界面电泳 是带电分子的移动速率通过观察界面的移动来测定,该法已成为历史。目前被支持介质的区带电泳所取代。
1.2 区带电泳 固体支持介质可分为两类:一类是滤纸,乙酸纤维素薄膜、硅胶、矾土、纤维素等;另一类是淀粉、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶。后者的优点为:(1)由于具有微细的多孔网状结构,故在电泳时除了能产生电荷效应外,还有分子筛效应,小分子物质比大分子物质跑的快而使分辨率提高。(2)几乎不吸附蛋白质,电泳无拖尾现象。(3)蛋白质在低浓度琼脂糖电泳时可以自由穿透,阻力小,分离清晰,透明度高,能透过200-700nm波长的光线,故电泳结束后无须“透明”,可减少操作步骤及由此引起的实验误差,又因底板无光泽,也提高了对着色区的检测敏感性。为此,第一类支持介质现已被第二类支持介质替代。
1.3 稳态电泳 其特点是分子颗粒的电泳迁移在一定时间后达到稳态,如等电聚焦和等速电泳等。
2.干扰因素
颗粒性质、电场强度、溶液性质、PH、离子强度、溶液粘度、电渗焦耳热和筛孔(支持物)等。
γ-GT同工酶目前主要用电泳法来测定,但使用不同支持物进行电泳,分离出来的同工酶区带数量和位置可以不同。按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统:即移动界面电泳,区带电泳和稳态电泳或称置换电泳。
1.1 自由移动界面电泳 是带电分子的移动速率通过观察界面的移动来测定,该法已成为历史。目前被支持介质的区带电泳所取代。
1.2 区带电泳 固体支持介质可分为两类:一类是滤纸,乙酸纤维素薄膜、硅胶、矾土、纤维素等;另一类是淀粉、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶。后者的优点为:(1)由于具有微细的多孔网状结构,故在电泳时除了能产生电荷效应外,还有分子筛效应,小分子物质比大分子物质跑的快而使分辨率提高。(2)几乎不吸附蛋白质,电泳无拖尾现象。(3)蛋白质在低浓度琼脂糖电泳时可以自由穿透,阻力小,分离清晰,透明度高,能透过200-700nm波长的光线,故电泳结束后无须“透明”,可减少操作步骤及由此引起的实验误差,又因底板无光泽,也提高了对着色区的检测敏感性。为此,第一类支持介质现已被第二类支持介质替代。
1.3 稳态电泳 其特点是分子颗粒的电泳迁移在一定时间后达到稳态,如等电聚焦和等速电泳等。
2.干扰因素
颗粒性质、电场强度、溶液性质、PH、离子强度、溶液粘度、电渗焦耳热和筛孔(支持物)等。
抽血前的一周内应该保持正常的生活状态,以使身体处于一个稳定的代谢水平;采血前应使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,空腹十小时以上。
在病人安静状态下静脉采血2-3ml。
静脉采血:除非是卧床病人,一般取坐位采血。体位影响水分在血管内外的分布,干扰测定结果,故在采血前应静坐5min。一般自肘静脉采血,使用止血带的时间不超过1min,穿刺成功后应立即松开止血带。
抗凝剂选择:一般无需抗凝剂,用血清标本检测。
采集后注入试管中,防止剧烈震荡,并尽快送往化验室。
静脉采血:除非是卧床病人,一般取坐位采血。体位影响水分在血管内外的分布,干扰测定结果,故在采血前应静坐5min。一般自肘静脉采血,使用止血带的时间不超过1min,穿刺成功后应立即松开止血带。
抗凝剂选择:一般无需抗凝剂,用血清标本检测。
采集后注入试管中,防止剧烈震荡,并尽快送往化验室。
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