细胞受到刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后, 被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF孔板出现“紫色”的斑点表明细胞产生了细胞因子,通过ELISPOT酶联斑点分析系统对斑点的分析后得出结果.
Elispot
阴性
TNF主要由巨噬细胞和单核细胞产生。已发现TNF可对众多的组织器官产生生物效应,它是体内细胞因子网络中重要的多功能物质。TNF具有多种生物效应,主要是介导抗肿瘤及调节机体的免疫功能,也是炎症反应介质之一,参与炎症病变的多方面病理变化。测定血清或其他体液中TNF浓度,是基础医学和临床多种疾病的诊疗很有价值的指标。
1.肿瘤:许多肿瘤细胞可产生TNF,因此在多种肿瘤时机体内TNF表达明显升高。TNF又可通过细胞毒作用,杀死肿瘤细胞或抑制某些肿瘤细胞增殖。
2.风湿性关节炎患者的滑膜中有大量TNF。
3.在脓毒败血症、感染性肺炎等严重炎性疾病时血清中TNF含量明显增高。许多寄生虫病患者中TNF也显著改变。艾滋病患者体液中TNF也高于正常人。疟疾抗原、病毒和细菌均可诱导TNF产生,TNF又反过来具有抗病毒、抗细菌、抗疟疾作用。
4.TNF与移植排斥反应密切相关,在患者的血清或尿液中TNF的表达与排斥反应程度呈正相关。
1.肿瘤:许多肿瘤细胞可产生TNF,因此在多种肿瘤时机体内TNF表达明显升高。TNF又可通过细胞毒作用,杀死肿瘤细胞或抑制某些肿瘤细胞增殖。
2.风湿性关节炎患者的滑膜中有大量TNF。
3.在脓毒败血症、感染性肺炎等严重炎性疾病时血清中TNF含量明显增高。许多寄生虫病患者中TNF也显著改变。艾滋病患者体液中TNF也高于正常人。疟疾抗原、病毒和细菌均可诱导TNF产生,TNF又反过来具有抗病毒、抗细菌、抗疟疾作用。
4.TNF与移植排斥反应密切相关,在患者的血清或尿液中TNF的表达与排斥反应程度呈正相关。
1.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
2.血浆标本推荐用EDTA的方法收集;
3.标本应该清澈透明,检测前样本中有悬浮物应通过离心去除;
4.勿使用溶血,高血脂或污染的标本
5. 尿液用无菌管收集离心去除沉淀,胸腹水、脑脊液参照实行;
6.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2.血浆标本推荐用EDTA的方法收集;
3.标本应该清澈透明,检测前样本中有悬浮物应通过离心去除;
4.勿使用溶血,高血脂或污染的标本
5. 尿液用无菌管收集离心去除沉淀,胸腹水、脑脊液参照实行;
6.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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