英文名称：iso-CK
项目介绍 ：
CK是由M和B两个亚单位组成的二聚体，在细胞质内共有CK-BB、CK-MM、CK-MB三种同工酶。在细胞线粒体内，还有另一种同工酶称之为CK-Mt。CK-BB主要存在于脑、前列腺等器官，CK-MM主要存在于骨骼和心肌，CK-MB则主要存在于心肌。正常人血液中大部分是CK-MM，少量CK-MB，而CK-BB极少。几种CK同工酶的分子量虽然相同，但免疫特性和电泳迁移率各不相同。在电泳时，CK-BB迁移最快，走在阳极白蛋白区，CK-MB居中，位于α和β球蛋白区，CK-MM较慢，位于阴极γ-球蛋白区，CK-Mt迁移率最低，位于CK-MM之后。电泳后进行酶促反应显色，观察结果。
电泳毕，用酶、辅酶、底物覆盖温育后，在光密度计340nm进行荧光扫描检测，或用底物温育后再覆盖吩嗪二甲酯硫酸盐-氯化硝基四氮唑蓝，使酶区带呈紫蓝色，用可见光扫描检测。
患轻度或中度脑损伤病人的血清CK-BB明显高于对照组，血清CK-BB的高低与脑损伤范围的大小及死亡率的高低相一致；在脑血管意外及脑手术后，血清CK-BB亦可升高。新生儿产程窒息，若CSFCK-BB升高，多提示脑组织发生实质性损害；若CK-BB超过CSF-CF总活性15%，则易发生脑性轻瘫、智力发育障碍等严重后遗症。
急性心肌梗塞病人胸痛发作开始2小时，血清CK-BB已见升高，7～20小时达峰值（为对照组的3～100倍），然后迅速下降。其敏感性优于CK总活性测定，且早于CK-MB， 对急性心肌梗塞是一项敏感而早期的指标。
各种心血管手术15分钟，血中CK-BB也已上升，当天即达峰值（为正常均值的6～10倍），至第3～4天恢复正常。CK-BB的变化是单纯心肌创伤的特异指标。有89%的前列腺癌病人血中CK-BB含量升高。其他肿瘤若发生广泛转移时，血中CK-BB亦明显高于无继发癌灶的病例。由于CK-BB主要存在于自内胚层发生的器官，当这些器官发生病变时，血中CK-BB常少升高，故测定血中CK-BB，可能有助于内胚层源性组织肿瘤的诊断。
2. CK-MB（CK2）
血清CK-MB测定的最重要意义在于诊断急性心肌梗塞。急性心肌梗塞胸痛发作后4～6小时，病人血清CK-MB先于总活性开始升高，12～36小时达峰值；多在72小时内恢复正常。其最高值达对照组4.9～22倍以上。如果梗塞后3～4天，CK-MB仍持续不降，表明心肌梗塞仍在继续进行，如果已下降的CK-MB再次升高则提示原梗塞部位病变扩展或有新的梗塞病灶；如果胸痛患者在48小时内尚未出现CK-MB升高，或小于总活性的2%，即可排除急性心肌梗塞的诊断。临床上常以CK-MB超过CK总活性的3%（离子交换柱层析法）或10%（免疫抑制法）作为急性心肌梗塞的诊断依据。
用CK-MB诊断急性心肌梗塞时必须注意无论是CK-MB的绝对活性或占总活性百分率的界限值，均不适用于14岁以下的儿童，因为婴幼儿和儿童的CK-MB均高于成人。各种类型的心脏手术后可引起血清CK-MB活性增强，在并发术间或术后心肌梗塞时升高更为显著。进行性肌营养不良病人血清CK-MB亦升高。
3. CK-MM（CK3）
骨骼肌几乎只含CK-MM，心肌中除CK-MB外，也主要含此型同工酶。CK-MM是健康成人血清CK的主要成份。
用琼脂糖凝胶电泳进一步分离其亚带发现，心肌梗塞发病10小时内，首先是CK-MM2和CK-MM3升高。而后，CK-MM1进行性增加，而CK-MM2和CK-MM3逐渐消失，故在急性心肌梗塞的病人，其血中CK-MB消失后CK总活性升高，实为CK-MM1亚带升高所致。CK-MM3/MM1比值在胸痛发作后6小时从0.38基线开始上升，10小时达高峰，共比值为1.2～4.2。比值增加常在总酶活性升高之前出现，是一种敏感的早期诊断依据，可作为早期诊断急性心肌梗塞的一种检测方法。
CK-MM可见于肌肉创伤、感染、惊厥、癫痫等，特别是破伤风可导致病人血清CK-MM高于正常人7倍。 缺氧、进行性肌营养不良，肺梗塞，甲状腺机能低下，脑血管疾病，巴比妥或其它外源性毒物中毒，亦会引起血清CK-MM升高。
4. 巨型CK（M-CK）
成人血清M-CK1（CK-BB与免疫球蛋白的复合物）虽与特定疾病无关，但对因产程窒息缺氧发生脑性瘫痪或癫痫的新生儿来说，其血清M-CK1则是肯定神经损伤的早期指标，是脑组织长期缺氧后，释出的CK-BB在血中与Ig聚合的结果，对于判断疗效亦有潜在的价值。
M-CK2主要来自肝脏或肿瘤组织。M-CK2是CK-Mt(CK4)在细胞严重损伤后，释放血中聚合而成的巨分子酶，见于恶性肿瘤、肝硬化、心脏病、高脂血症等病人的血清，常是病情恶化、预后不佳的标志，但亦有随疾病恢复而自行消失者。
CK-BB 0%；
CK-MB 0%～3%；
CK-MM 97%～100%；
CK-Mt 0%；
CK-MB的阳性决定水平为5%。
电泳法操作复杂，耗时较多,但其特点是准确可靠。当出现一些异常同工酶如巨CK1 、巨CK 2 等，从电泳图谱上很容易发现，并可通过光密度计进行定量测定，不会将CK-BB和各种异常同工酶误认为是CK-MB而误诊。其主要缺点是灵敏度较差。
2.干扰因素
电泳法会受溶血和巨CK的干扰。
琼脂糖凝胶电泳法的注意事项：广泛存在于各种组织的腺苷酸激酶(AK)催化ADP产生ATP，干扰同工酶结果的判断。加入AMP可抑制此反应，但过量AMP也抑制CK。NaF抑制AK，不抑制CK，与AMP合用可抑制各种AK同工酶的97％。NaF与CK激活剂Mg2+ 可逐渐形成MgF2 沉淀，所以，NaF与Mg2+ 分开配制，临时混合，不影响各自的作用。电泳需较高pH，酶反应需较低pH，本法中用低离子强度，pH低于8.6的电泳缓冲液；高离子强度，pH低于6.7的基质缓冲液。当含琼脂糖的基质显色剂覆盖于电泳后的凝胶板，上下凝胶中的成分相互扩散后的pH，恰为酶作用的最适pH。Bis-Tris全名为双(2-羟乙基)氨基(三羟甲基)甲烷，25℃时pKa＝6.46，是CK同工酶测定优选的缓冲剂。200mmol/L时，CK活力最大。如无Bis-Tris，亦可用咪唑加EDTA作基质缓冲液。EDTA作Ca2+ 的络合剂，因Ca2+ 抑制CK活力。血清CK活力随温度升高而增加，直至45℃，此后更高温度CK活性迅速下降，56℃时很快失活。琼脂糖电泳法测CK同工酶，绝不能像做LDH同工酶电泳那样用温度较高的琼脂糖基质显色液，否则CK活力丧失，而非脱氢酶反应(NDH)显著。NDH是相当于白蛋白及β球蛋白区带处的紫红色区带，与蛋白质的巯基有关，标本用量大、pH高时尤其明显，仅四唑盐及PMS就可与标本产生，用测NADPH荧光法可避免。
本法中标本用量少，显色时pH较低，NDH反应不明显。CK是巯基酶，绝对需要巯基试剂活化。但巯基试剂可还原四唑盐，N-乙酰半胱氨酸及谷胱甘肽还原四唑盐能力弱，可使背景清晰。PVP是隋性聚合体，作为酶扩散的障碍物加入，可改善区带分离效果。CK不稳定，对光、热及高pH敏感，最好将及时分出的血清充C02 后塞紧管口，置冰室或-30℃保存，至少可稳定半个月，及时测定更好。不主张加巯基活化剂保存。影响CK同工酶电泳与显色的因素很多，必须同时作控制物。
静脉采血：除非是卧床病人，一般取坐位采血。体位影响水分在血管内外的分布，干扰测定结果，故在采血前应静坐5min。一般自肘静脉采血，使用止血带的时间不超过1min，穿刺成功后应立即松开止血带。
采集后注入试管中，防止剧烈震荡，并尽快送往化验室。CK同工酶检测血清和血浆均可。在4℃可保存数天，-15℃可保存2周，若用血浆宜用EGTA，而不用EDTA抗凝。冷冻血浆测定时，应在30℃以下融化，需反复冰融者应加还原剂——巯基乙醇以稳定酶活性，速冻及贮存于-20℃或-70℃，在有β-巯基乙醇和EGTA存在时，MM和MB可稳定数年，而BB则仅稳定半年。由于CK同工酶半衰期短，故酶活性的高低受标本采集时间的影响较大。