英文名称:fecal occult blood test,FOBT
项目介绍 :
上消化道出血量小于5ml,粪便中无可见的血液,且红细胞破坏,显微镜检查也未见红细胞,而需用化学法、免疫法等才能证实的出血,称为隐血,检查粪便隐血的试验称为粪便隐血试验。
有何用途 :
FOBT的主要用途是对结肠癌进行筛选,便血为早期肿瘤的唯一症状,肿瘤发现越早,治愈的几率越大。FOBT并非癌症的特异性指标,故应对可引起胃肠道出血的其他消化道疾病进行排除。FOBT的第二个用途是对贫血原因进行诊断,如消化道溃疡引起的贫血。如果您出现贫血的症状和体征,如容易疲劳、低血红蛋白和低血细胞比容,或者长期黑便,将进行FOBT检查。
何时检测:
FOBT为常规体检的一部分,早期被作为诊断结肠癌的筛查指标。美国癌症学会及相关组织建议自50岁起每年应进行1次检查,根据家族史,医师也会建议进行FOBT检查。
1.隐血试验阳性见于消化道出血。药物致胃黏膜损伤(如服用阿司匹林、吲哚美辛、糖皮质激素等)、肠结核、Crohn病、胃病(胃溃疡、各种胃炎)、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病、消化道恶性肿瘤等。
2.消化性溃疡与肿瘤出血的鉴别 隐血试验对消化道溃疡的阳性诊断率为40%~70%,呈间断性阳性;治疗后,当粪便外观正常时.隐血试验阳性仍可持续5~7d,如出血完全停止,隐血试验即可转阴。消化道恶性肿瘤阳性率早期为20%,晚期可达95%,且呈持续性阳性。
3.对消化道肿瘤(胃癌、大肠癌)早期检查仍缺乏较好手段。但临床研究证明,消化道肿瘤患者隐血试验阳性率平均为87%,所以粪便隐血检查具有十分重要的意义。美国临床生物化学学会关于FOBT临床应用循证评价时,强烈建议对超过50岁以上人群,进行1年1次或2年1次愈创木脂法FOBT筛检,因为FOBT简便、价廉、对患者无危害,且有3项大规模随机对照试验(循证证据水平I~Ⅱ级)显示可减少15%~33%结直肠癌死亡率(注意,FOBT不能减低结直肠癌发病率)。
1.化学法
化学法为常用方法,化学法虽有多种色原性反应底物,但基本检测原理相似。常用的有邻联甲苯胺法、愈创木酯法等,传统使用的化学试验已经被目前的试带法所替代,使检测更加便捷。
(1)灵敏度和特异性:
隐血试验化学法的方法学评价见下表。邻联甲苯胺法为1983年中华医学会全国临床检验方法学学术会推荐的方法。试带法虽然使用方便,但试剂不稳定、特异性较低。
方法 | 特点 | 评价 |
---|---|---|
邻联甲苯胺法 | 高灵敏度、假阳性高 | Hb 0.2~1.0mg/L即可检出,消化道有1~5 m1出血就可检出。 灵敏度过高方法,有微量血液即呈阳性反应。故高灵敏度试验阴性 时,即确认隐血为阴性。 |
匹拉米洞法 | 中灵敏度、中特异性 | Hb 1~5mg/L即可检出,消化道有出血即为阳性。 |
愈创木酯法 | 低灵敏度、高特异性 | Hb 6~l0mg/L可检出(此时消化道出血可达20nd);受食物、药物 影响因素少,假阳性低。故如低灵敏度试验阳性时,即确定为隐血为阳性。 |
(2)干扰因素:
隐血试验化学法的干扰因素与评价见下表。
因素 | 评价 |
---|---|
标本因素 | ①假阴性:因标本陈旧灵敏度而减低,血液在肠道停留过久,血红蛋白被细菌降解,血红素消失。 ②假阳性:隐血来源于非消化道如齿龈出血、鼻出血、月经血等。 |
食物因素 | 假阳性见于含血红蛋白的动物血,如鱼、肉、肝脏,含过氧化物酶的叶绿素新鲜蔬菜。 |
药物因素 | ①假阳性:使用铁剂、铋剂,引起胃肠道出血药物如阿司匹林、皮质同醇、非类固醇抗炎药、引起肠炎药物、秋水仙素、萝芙木碱中药。 ②假阴性:服大量维生素c或其他具还原作用药物。 |
器材和试剂 | ①假阳性:器材污染铜离子、铁离子、消毒剂、溴、铁、硼酸、过氧化物酶。 ②假阴性:过氧化氢浓度低或过氧化氢旧失效、试剂保存温度和湿度不当如冰冻、受光、受热和受潮等可失效。 |
操作过程 | 假阴性见于试验反应时间不足、显色判断不准。试验前在标本中加水减低灵敏度,而实际上同时增高了假阳性。 |
2.免疫学方法
免疫学方法以免疫胶体金法的优点较多:胶体金性质稳定,并能呈色;胶体金与单克隆抗体结合稳定性好,可定性和半定量测定,判断结果准确;灵敏度高,检测便捷、特异等。
(1)灵敏度和特异性:
1)灵敏度:美国癌症学会认为免疫法在特异性和灵敏度上等于或好于愈刨木酯法,不受食物因素影响,无须禁食。一般血红蛋白仅为0.2pg/ml或0.03mg/g时就可呈阳性结果。
2)特异性:免疫学法不受动物血红蛋白(500μg/m1)和辣根过氧化酶(200pg/m1)等干扰。表明单克隆抗体隐血试验对人隐血具有高度特异性。用单克隆抗体法检测食用新鲜蔬菜、铁剂、维生素c患者的粪便均为阴性;而愈创木酯法检测则均呈假阳性。
(2)干扰因素:
粪便隐血试验免疫法干扰因素与评价见下表。
因素 | 评价 |
---|---|
生理因素 | 胃肠道每天排出血液0.5~1.5ml/24h,个别可达3ml/24h,长跑运动员平均可达4ml/24h。 服用阿司匹林2.5g,即可引起消化道出血2~5mL/24h。免疫学检查法粪隐血可呈阳性。 |
标本因素 | 假阴性见于消化道大量出血,血红蛋白浓度过高,即抗原过剩时,此为后带现象。 假阴性还可见于上消化道出血,如血红蛋白经过肠道消化酶降解变性,丧失原有 免疫原性或单克隆抗体与血红蛋白抗原不匹配。 |
食物因素 | 各种动物血红蛋白(500mg/L)、辣根过氧化物酶(200mg/L)对免疫法无干扰, 故不必限制饮食。 |
药物因素 | 单克隆抗体肢体金法具有特异性强、灵敏度高、检测简便等优点;但正常人或某些患者 服用刺激胃肠道药物后可造成假阳性。 |
器材和试剂 | 试剂盒保存不当、失效等出现假阴性。 |
操作过程 | 直接使用低温保存(15℃以下)的标本试验,可出现假阴性结果。 |
3.其他方法
(1)血红蛋白荧光测定:采用卟啉荧光血红蛋白定量试验,以热草酸为试剂,使血红素为原卟啉进行荧光检测.除可测定未降解的血红蛋白外.还可测定血红素衍化物卟啉,克服了化学法和免疫法受血红蛋白降解而影响检测结果的缺点,对上、下消化道出血有同样的灵敏度(2mg/g粪便),但仍受外源性血红素、卟啉类物质干扰,且方法较复杂(手工法需90min),而未能推广。灵敏度是愈创木酯法的2倍,但特异性减低。患者食用肉类和服用阿司匹林影响试验:
(2)放射性核素铬(51Cr)法:用51Cr标记红细胞,可测定出血量,灵敏度高于化学法,检测隐血特异,不受外源性动物血红蛋白等影响,故无需限制饮食。因价格贵和放射因素,限制了广泛应用、不适宜对人群筛检。
(3)转铁蛋白法:灵敏度达2mg/L。单独或联合检测隐血可作为消化道出血的有效标志。当胃肠道出血时,粪便中可出现大量的Tf。Tf抗菌能力强.稳定性高于Hb。Tf与粪便混悬液在37℃孵育4h后,抗原活性无明显变化,而Hb已丧失65%抗原活性。可见Tf兼有证实肠道出血的特异性和对抗细菌分解的稳定性,是检测消化道出血的良好指标。联合检测Tf和Hb,以均高于Hb10μg/g粪便为临界值,则结肠癌阳性率为94.4%。结肠息肉阳性率为53.3%,上消化道出血为55%;故联合检测Tf和Hb,假阴性减低,有助于筛检早期大肠癌。
(4)HemeSelect免疫法:运用反向被动血凝法原理,可检测完整的血红蛋白和球蛋白,主要用于检测结肠损害情况,但检测费用高。
近年来,一种灵敏度高于化学法而特异性并不减低的非隐血试验,检测结直肠癌
患者粪便DNA基因(如APC、p53、K-ras基因)突变的新方法已经进行临床研究。
标本的运送:一般常温用标本容器送检,标本容器上需粘贴患者标识号,该标识号可以是条形码,也可以是申请单的联号。如果是条形码应包含患者姓名、检验目的、标本类型、标本采集日期等信息。