中文名称:梅毒螺旋体特异抗体测定
  英文名称:Specific Treponema Pallidum Antibody
项目介绍:
  梅毒(syphilis)属于一种性传播疾病,病原体为苍白密螺旋体(Treponema pallidum,TP)苍白亚种,又称梅毒螺旋体。梅毒螺旋体存在于病人的血液或脑脊液内,在特殊厌氧环境里可体外人工培养。当病人感染梅毒螺旋体后3-4周,可在血液中检出针对梅毒螺旋体特异性抗体,并在治疗后相当长时间内仍然可检出。在病人血清中可检出二种抗体,一种是针对非螺旋体抗原的抗体(即针对牛心肌磷脂的抗体,如RPR及国内一些EIA和金标法均是检测此非特异性抗体),这种抗体在疾病活动期可检出,但在治疗后或疾病转入慢性期后会很快下降,而另一种是针对螺旋体抗原的特异性抗体,治疗后仍可在相当长的时间内检出,在疾病的慢性期也保持高滴度反应。
有何用途:
  试验用于诊断性生活频繁人群的梅毒感染。妊娠妇女也是被筛查的对象,美国的许多州都将梅毒血清试验列为领取结婚证前必查项目,以防止梅毒传播,特别是防止新生儿感染。
何时检测:
  有如下情况时医师会要求梅毒检测:出现梅毒相关症状,如生殖器或咽喉部出现硬下疳(溃疡);正在接受其他性病的治疗,如淋病;妊娠妇女,因为未治疗梅毒可能感染胎儿,甚至导致胎儿死亡;患者有类似于梅毒感染的非特异性症状时,以查找真正的病因。
(1)梅毒螺旋体特异抗体测定,用活的或死的梅毒螺旋体或其成分作为抗原,检测血清中抗梅毒螺旋体IgG或IgM抗体,其敏感性和特异性均高,可用作确认试验,对潜伏期和晚期梅毒敏感性更高。
(2)梅毒螺旋体特异抗体阳性,只提示所测标本中有抗TP抗体存在,不能作为患者感染梅毒螺旋体的绝对依据,阴性结果也不可排除梅毒螺旋体感染,检测结果应结合临床综合分析。
(3)由于各种梅毒血清学检测方法,并不都能在梅毒的不同病期检测出抗类脂质抗体或抗TP抗体,为提高检出率,最好每次用2种以上的方法学检测。
(4)血清中抗梅毒螺旋体抗体,除IgM外,即使经过足够治疗,仍能长期存在,甚至终身不消失,血清反应持续存在阳性,因此,不适用观察疗效,复发及再感染。但经治疗后ⅠgM比抗心拟脂抗体消失快,因此它的存在是活动性梅毒的一个指征。
  免疫荧光吸收试验(FTA-ABS):为阴性。
  间接血凝试验(TPHA):阴性
1. 灵敏度和特异性
1)荧光密螺旋体抗体吸收试验( FTA-ABS)
  是以密螺旋体无毒株(Reiter 株) 抗原吸收待检血清,排除了同属抗原的交叉结合,保证了试验结果的特异性;以整条梅毒螺旋体检测血清中抗体,确保各种抗原分子的完整存在,提高了试验的敏感性。文献报道FTA-ABS 对各期梅毒检测的特异性达到92 % ,敏感性对Ⅰ期梅毒为80 %、Ⅱ期为99 %~100 %、Ⅲ期为95 %~100 %。FTA-ABS-IgG不能反映病程活动性,不能诊断胎传梅毒,而用FTA-ABS-IgM 检测IgM抗体来诊断胎传梅毒。它的主要缺点是需荧光显微镜设备,实验人员要有一定的专业技能和工作经验,尤其当标本荧光微弱病情可疑时,试验结果判定常带有主观色彩。少数情况下也有出现生物学假阳性的报道。美国常用此试验作为梅毒的确认试验。
2)梅毒螺旋体血球凝集试验( TPHA)
  是目前国内许多医院常用的梅毒血清确认试验。用生物细胞(火鸡或羊红细胞) 做抗原载体,吸附从兔睾丸中提取的粗制梅毒螺旋体粉碎物抗原,检测血清中特异性梅毒螺旋体抗体。试剂制备过程中用兔睾丸提取物、兔血清及Reiter 株做吸收剂,排除了各种非特异性反应,因此TPHA 的敏感性和特异性较高。缺点是试剂成本较高、不易保存、操作较麻烦、且易发生自凝现象和生物学假阳性。
3)梅毒螺旋体明胶凝集试验( TPPA)
  与TPHA 试验不同,TPPA 试验是将特异性梅毒螺旋体抗原包被在明胶颗粒上,省略了吸收剂,不受生物因素影响,与血清上的特异性抗体结合后出现肉眼可见的凝集反应的检测方法。TPPA作为梅毒抗体检测的确证方法,有着很高的敏感度和特异性,有文献报道TPPA的敏感性比TPHA 好。操作较简便、结果易清晰判断,但价格昂贵和结果判断难以自动化等缺点限制其用于血站大规模的血液筛查。
4)梅毒螺旋体免疫印迹试验(Western immunoblottingtechnique)
  是20 世纪80 年代发展起来的一种检测技术,它结合了免疫学和分子生物学的特点,敏感性高,特异性强。该试验是通过电泳转移硝酸纤维膜抗原条上含有梅毒螺旋体的各种成分来确认是否梅毒感染。研究证实只有1515kD和45kD 两区带是梅毒螺旋体特异性抗原,若两区带任何一条出现阳性即可判定梅毒感染。该文献报道用免疫印记法检测梅毒时,上述两种区带几乎100 %阳性,而其他螺旋体及正常人血清与其不发生结合。Dettori 等认为免疫印记法用于梅毒诊断优于FTA-ABS 和TPHA 方法,对Ⅱ期梅毒或早期潜伏梅毒、神经梅毒的阳性率均为100 %,Byrne等13 报道免疫印记法对于非螺旋体标本(包括正常标本、生物学假阳性标本以及γ球蛋白增高或抗核抗体的标本) 检测没有假阳性或可疑反应。免疫印记法操作简便,不要求试验仪器和环境,区带阴阳界限分明,结果容易判定。但应降低硝酸纤维膜抗原条的制备过程,以降低成本,还需对不同病期、不同类型的患者进行观察、比较。
5)梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验( TP-ELISA)
  TP-ELISA 方法检测梅毒螺旋体最早出现于1975 年,是将基因重组表达的梅毒膜特异性抗原包被在微孔板上,用双抗原夹心法测定梅毒特异性抗体。TP-ELISA 方法主要检测梅毒螺旋体IgG和IgM 抗体,文献报道TP-ELISA 方法的敏感性高于FTA-ABS 方法,对Ⅰ期梅毒的诊断灵敏度为93. 8 % ,对105 例各期梅毒的诊断灵敏度为97. 1 %,对245 例非梅毒血清的诊断特异性为100 %。TP-ELISA 方法检测操作简便,取样量少,不受样本中纤维蛋白和溶血等影响,1 次可进行多份样本的检测,结果用酶标仪分析,客观准确,结果便于保留及标准化管理, 可用作筛查和确认试验, 因此, TP-ELISA方法被公认为梅毒血清学诊断实验的首选方法。
2. 干扰因素
  服用了含有免疫球蛋白血液制剂的患者样品中,由于可能因服用的制剂而呈阳性反应,所以请注意对其做出准确判定。
1.梅毒的症状?
  梅毒的首发症状可能不会被立即发现。一期梅毒开始于感染后的10天到3个月内,通常在患者身体与其性伴侣溃疡接触的部位,如阴茎或阴道出现溃疡,即硬下疳。硬下疳可无痛而被忽视,几周左右后消失。
不及时治疗有什么后果?
  二期梅毒开始于硬下疳出现后的3~6周,特征是出现特异性的皮疹,通常可在数周或数月后自愈。还可以有其他如发热和喉咙痛症状。如果不加治疗,梅毒可能会进入到潜伏期,在此期间,可以没有症状,并且不具有传染性。然而,大约有三分之一的病例将进展到晚期的并发症阶段,或三期梅毒。此时,梅毒螺旋体可损害心脏、眼睛、大脑、神经系统、骨骼、关节及其他几乎任何的身体部位。这阶段可持续数年,最后导致精神疾病、失明、其他神经系统的问题、心脏病和死亡。
2.如何治疗?
  青霉素可以用于梅毒治疗。新发的感染较易治愈。感染超过1年的可能需要长期治疗。
  无特殊要求。
  常规静脉采血约2ml,置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管。 标本必须充分离心,接收标本后在2小时内将标本离心分离出血清或血浆。标本保存时间:血清标本若不能在8小时内测定,须2℃-8℃保存。若不能在72小时内测定,须-15℃—-20℃保存,标本禁止反复冻融。血浆标本可2℃-8℃保存72小时,禁止冻存。为避免标本中水分挥发使血清浓缩,对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
螺旋体检验

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