中文名称:血清乳酸脱氢酶同工酶电泳分析
  英文名称:iso-LDH,iso-LD
项目介绍 :
  人组织中的乳酸脱氢酶(LDH)用电泳法可以分离出5种同工酶区带,根据其电泳迁移率的快慢,依次命名为LDH1,LDH2,LDH3,LDH4,LDH5。不同组织的乳酸脱氢酶同工酶分布不同,存在明显的组织特异性,人心肌、肾和红细胞中以LDH1和LDH2最多,骨骼肌和肝中以LDH4和LDH5最多,而肺、脾、胰、甲状腺、肾上腺和淋巴结等组织中以LDH3最多。后来从睾丸和精子中发现了LDHX,其电泳迁移率介于LDH4和LDH5之间。LDH是由H(心肌型)和M(骨骼肌型)两类亚基组成,分别形成LDH1 (H4)、LDH2 (H3M)、LDH3 (H2M2)、LDH4 (HM3)、LDH5(M4)。
  心肌细胞LD活性远高于血清数百倍,尤以LDH1和LDH2含量最高。急性心肌梗塞时,血清LDH1和LDH2显著升高,约95%的病例的血清LDH1和LDH2比值大于1,且LDH1升高早于LDH总活性升高。病毒性和风湿性心肌炎及克山病心肌损害等,病人的血清LDH同工酶的改变与心肌梗塞相似。LDH1/ LDH2比值>1还见于溶血性贫血、恶性贫血、镰形细胞性贫血、肾脏损伤、肾皮质梗塞、心肌损伤性疾病、瓣膜病等。
  脑干含LDH1较高。颇脑损伤仅累及大脑半球时,只有血清同工酶谱的绝对值增高,而不影响同工酶的相互比值,如果累及脑干时,病人血清LDH1的含量也增高。
  急性心肌梗塞发病后12~24小时,血清LDH1也已升高。若同时测定LD总活性,可发现LDH1/总LDH的比值对急性心肌梗塞诊断的阳性率与可靠性优于单纯测定LDH1或CK-MB。
  胚胎细胞瘤病人的血清LDH1活性升高。
  肝细胞损伤或坏死后,向血流释入大量的LDH4和LDH5,致使血中LDH5/LDH4比值升高,故LDH5/LDH4>1可做为肝细胞损伤的指标。急性肝炎以LDH5明显升高,LDH4不增,LDH5/ LDH4>1为特征;若血清LDH5持续升高或下降后再度升高,则可认为是慢性肝炎;肝昏迷病人的血清LDH5、LDH4活性极高时,常示预后不良;原发性肝癌以血清LDH4>LDH5较为常见。
  肾皮质以LDH1和LDH2含量较高,肾髓质以LDH4和LDH5活性较强。患急性肾小管坏死、慢性肾盂肾炎、慢性肾小球肾炎以及肾移植排异时,血清LDH5均可增高。
肺含LDH3较多,肺部疾患时血清LDH3常可升高。肺梗塞时LDH3和LDH4相等,LDH1明显下降;肺脓肿病人的血清LDH3、LDH4常与LDH5同时升高。
  血清LD总活性升高而同工酶谱正常(LDH1/LDH2<1)的病例,临床出现率依次为;心肺疾病、恶性肿瘤、骨折、中枢神经系统疾患、炎症、肝硬变、传染性单核细胞增多症、甲状腺机能低下、尿毒症、组织坏死、病毒血症、肠梗阻等。
  肌营养不良病人肌肉中LDH1、LDH2明显增高,LDH5显著下降;而血清则相反,LDH1、LDH2明显减少,LDH4、LDH5显著增高,表明血清LDH同工酶主要来自肌肉组织。煤矿、钨矿矽肺病人的血清LDH1、LDH2下降,LDH4、LDH5升高。
  恶性病变时LDH3常增高。
  
琼脂糖电泳法:
        LDH1(28.4±5.3)%
        LDH2(41.0±5.0)%
        LDH3(19.0±4.0)%
        LDH4(6.6±3.5)%
        LDH5(4.6±3.0)%

醋酸纤维素薄膜法:
        LDH1(25.32±2.62)%
        LDH2(34.36±1.57)%
        LDH3(21.86±1.38)%
        LDH4(11.3±1.84)%
        LDH5(7.97±1.59)%

聚丙烯酰胺法:
        LDH1(26.9±0.4)%
        LDH2(36.0±0.5)%
        LDH3(21.9±0.4)%
        LDH4(11.1±0.4)%
        LDH5(4.1±0.3)%

总之,健康成人血清LDH同工酶有如下的规律:LDH2>LDH1>LDH3>LDH4>LDH5。

  无。
  无。
1.灵敏度和特异性
  按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统:即移动界面电泳,区带电泳和稳态电泳或称置换电泳。
1.1 自由移动界面电泳 是带电分子的移动速率通过观察界面的移动来测定,该法已成为历史。目前被支持介质的区带电泳所取代。
1.2 区带电泳 固体支持介质可分为两类:一类是滤纸,乙酸纤维素薄膜、硅胶、矾土、纤维素等;另一类是淀粉、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶。后者的优点为:(1)由于具有微细的多孔网状结构,故在电泳时除了能产生电荷效应外,还有分子筛效应,小分子物质比大分子物质跑的快而使分辨率提高。(2)几乎不吸附蛋白质,电泳无拖尾现象。(3)蛋白质在低浓度琼脂糖电泳时可以自由穿透,阻力小,分离清晰,透明度高,能透过200~700nm波长的光线,故电泳结束后无须“透明”,可减少操作步骤及由此引起的实验误差,又因底板无光泽,也提高了对着色区的检测敏感性。为此,第一类支持介质现已被第二类支持介质替代。
1.3 稳态电泳 其特点是分子颗粒的电泳迁移在一定时间后达到稳态,如等电聚焦和等速电泳等。

2.干扰因素
颗粒性质、电场强度、溶液性质、PH、离子强度、溶液粘度、电渗焦耳热和筛孔(支持物)等。

  采血前应使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,受检者一般无需禁食。
在病人安静状态下静脉采血2~3ml。
静脉采血:除非是卧床病人,一般取坐位采血。体位影响水分在血管内外的分布,干扰测定结果,故在采血前应静坐5min。一般自肘静脉采血,使用止血带的时间不超过1min,穿刺成功后应立即松开止血带。
抗凝剂选择:一般无需抗凝剂,用血清标本检测。
采集后注入试管中,防止剧烈震荡,并尽快送往化验室。
血心肌酶

Add new attachment

Only authorized users are allowed to upload new attachments.
« This page (revision-10) was last changed on 07-Dec-2012 10:49 by 1614216108