采用双抗体夹心ELISA法，用抗Pre-S1和抗-HBs作为固相化抗体和酶标抗体，如果标本中存在乙型肝炎病毒前S1抗原，则形成前S1抗体-前S1抗原-酶标抗体复合物，加入TMB底物产生显色反应，反之则无显色反应。通过双波长450/630纳米酶标仪测定吸光度，反应产物的颜色与样品中的含量呈正比。