中文名称:中性粒细胞趋化功能试验
英文名称:
项目介绍 :
中性粒细胞的运动有随意运动和定向运动之分,前者类似布朗运动。检测方法常用玻片法:将采集的白细胞悬液滴于玻片,以光学显微镜直接观察其运动。也可用毛细管法:将白细胞悬液装入硅化毛细管中,稍加离心,使细胞沉积于一端,切去无细胞一端的毛细管,再移至含细胞培养液的培养瓶中,37摄氏度温育18-20小时,游动的细胞将从毛细管内外移,于管口处形成一细胞团,可根据其细胞面积判断中性粒细胞活动的强度。严重酒精中毒及某些肿瘤患者,其中性粒细胞的随意运动明显减弱,甚至消失。中性粒细胞的定向运动表现为趋化运动,测定方法大同小异,原理相同。
英文名称:
项目介绍 :
中性粒细胞的运动有随意运动和定向运动之分,前者类似布朗运动。检测方法常用玻片法:将采集的白细胞悬液滴于玻片,以光学显微镜直接观察其运动。也可用毛细管法:将白细胞悬液装入硅化毛细管中,稍加离心,使细胞沉积于一端,切去无细胞一端的毛细管,再移至含细胞培养液的培养瓶中,37摄氏度温育18-20小时,游动的细胞将从毛细管内外移,于管口处形成一细胞团,可根据其细胞面积判断中性粒细胞活动的强度。严重酒精中毒及某些肿瘤患者,其中性粒细胞的随意运动明显减弱,甚至消失。中性粒细胞的定向运动表现为趋化运动,测定方法大同小异,原理相同。
中性粒细胞在趋化因子如微生物的细胞成分及其代谢产物、补体活性片段C5a、C3a、某些细胞因子等作用下产生趋化运动,其趋化运动强度可反映中性粒细胞的趋化功能。
阴性
无
无
(一)体内试验法(皮肤窗法)
在前臂屈侧中央按直径3mm大小搔破皮肤,用无菌盖玻片压紧固定,于第2、5、8、12、24和36h后各取样一次,染色观察中性粒细胞聚集的开始时间、程度和形态变化。
健康人白细胞在皮窗处2-3h形如聚焦,细胞数达50-100个,6h可达1000个以上。初期以中性粒细胞为主,以后单核细胞逐渐增多。
(二)体外试验法
1.滤膜小室法(Boyden小室法)为一特殊的小盒装置,盒中用一片3-5um孔径的微孔滤膜隔为上下两个小室(滤膜光滑的一面朝下)。上室加待检白细胞悬液,下室加细菌菌体或其产物、酵母菌活化的血清等趋化因子。将该盒移至37摄氏温育数小时。上室中的中性粒细胞因受下室内趋化因子的吸引,经滤膜微孔进入滤膜内。最后以滤膜,经固定、干燥、染色、脱色等步骤,用油镜检测细胞在透明滤膜内通过的距离,求其趋化单位。
2.琼脂糖凝胶平板法 将含小牛血清的1%琼脂糖倾倒在玻片或平皿中,制成凝胶平板,并打孔。每三孔为一组,中央孔加中性粒细胞悬液,两侧孔分别加趋化因子或对照培养液。经37摄氏度温育2-3小时后,用2%戊二醛固定,移去琼脂糖层,经染色后测量细胞运动的距离,按下式计算移动指数。
移动指数=趋化移动距离/随意移动距离
白细胞运动功能的检测结果相差较大,各实验室宜根据自身条件制定相应参考值。
在前臂屈侧中央按直径3mm大小搔破皮肤,用无菌盖玻片压紧固定,于第2、5、8、12、24和36h后各取样一次,染色观察中性粒细胞聚集的开始时间、程度和形态变化。
健康人白细胞在皮窗处2-3h形如聚焦,细胞数达50-100个,6h可达1000个以上。初期以中性粒细胞为主,以后单核细胞逐渐增多。
(二)体外试验法
1.滤膜小室法(Boyden小室法)为一特殊的小盒装置,盒中用一片3-5um孔径的微孔滤膜隔为上下两个小室(滤膜光滑的一面朝下)。上室加待检白细胞悬液,下室加细菌菌体或其产物、酵母菌活化的血清等趋化因子。将该盒移至37摄氏温育数小时。上室中的中性粒细胞因受下室内趋化因子的吸引,经滤膜微孔进入滤膜内。最后以滤膜,经固定、干燥、染色、脱色等步骤,用油镜检测细胞在透明滤膜内通过的距离,求其趋化单位。
2.琼脂糖凝胶平板法 将含小牛血清的1%琼脂糖倾倒在玻片或平皿中,制成凝胶平板,并打孔。每三孔为一组,中央孔加中性粒细胞悬液,两侧孔分别加趋化因子或对照培养液。经37摄氏度温育2-3小时后,用2%戊二醛固定,移去琼脂糖层,经染色后测量细胞运动的距离,按下式计算移动指数。
移动指数=趋化移动距离/随意移动距离
白细胞运动功能的检测结果相差较大,各实验室宜根据自身条件制定相应参考值。
无特殊要求
无特殊要求
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