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| 英文名称：lymphocyte transformation test\\ |
| 英文名称：[lymphocyte transformation test]\\ |
| __项目介绍 ：__\\ |
| T淋巴细胞转化实验是检测T细胞免疫功能的经典试验，基本原理是采用T细胞敏感的刺激物在体外刺激T细胞，T细胞受到刺激后将发生增殖、分化、转化，根据其增殖转化能力评定相应细胞功能。\\ |
| 最常采用PHA作为刺激物参与试验。虽然T细胞对特异性和非特异性抗原的识别过程不同，但被激活拍，激发的分裂和增殖过程相同，因此根据非特异性促有丝分裂原激活T细胞增殖反应程度，同样可检测T细胞识别特异性抗原的增殖反应。\\ |
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| 1．形态学：正常情况下，健康人外周血经PHA刺激的淋巴细胞转化率为60-80%，小于50%可视为降低。\\ |
| 2. 放射性核素法： 刺激指数（SI）>2。\\ |
| 1．形态学：正常情况下，健康人外周血经PHA刺激的淋巴细胞转化率为60-80%，小于50%可视为降低。\\ |
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| 2. 放射性核素法： 刺激指数（SI）>2。\\ |
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| %%tab-医学决定水平 |
| 无\\ |
| /% |
| %%tab-危急值范围 |
| 无\\ |
| /% |
| %%tab-影响因素 |
| 一、项目介绍\\ |
| T淋巴细胞转化实验是检测T细胞免疫功能的经典试验，基本原理是采用T细胞敏感的刺激物在体外刺激T细胞，T细胞受到刺激后将发生增殖、分化、转化，根据其增殖转化能力评定相应细胞功能。\\ |
| 最常采用PHA作为刺激物参与试验。虽然T细胞对特异性和非特异性抗原的识别过程不同，但被激活拍，激发的分裂和增殖过程相同，因此根据非特异性促有丝分裂原激活T细胞增殖反应程度，同样可检测T细胞识别特异性抗原的增殖反应。\\ |
| 二、检测方法\\ |
| 1.形态法 其主要实验过程是将外周血液或分离的单个核细胞与适量PHA或其他刺激物混合，置37摄氏度培养72h，取培养细胞作涂片染色镜检。PHA可与T细胞膜上的受体结合，使腺苷酸环化酶活化，导致c AMP增多，从而使T细胞发生转化，出现细胞变大，胞质扩大，空泡、核仁明显和核染色质疏松等变化。根据细胞的大小，核与胞质的比例，胞质的染色性及核结构、有无核仁等特征，分别计数原淋巴细胞、过渡型母细胞和未转化的小林巴细胞。\\ |
| 原淋巴细胞、过渡型母细胞计为转化的淋巴细胞，每份标本计数200个细胞，按下式计算转化率：\\ |
| %%tab-方法学评价 |
| __1.形态法__\\ |
| 其主要实验过程是将外周血液或分离的单个核细胞与适量PHA或其他刺激物混合，置37摄氏度培养72h，取培养细胞作涂片染色镜检。PHA可与T细胞膜上的受体结合，使腺苷酸环化酶活化，导致c AMP增多，从而使T细胞发生转化，出现细胞变大，胞质扩大，空泡、核仁明显和核染色质疏松等变化。根据细胞的大小，核与胞质的比例，胞质的染色性及核结构、有无核仁等特征，分别计数原淋巴细胞、过渡型母细胞和未转化的小林巴细胞。\\ |
| 原淋巴细胞、过渡型母细胞计为转化的淋巴细胞，每份标本计数200个细胞，按下式计算转化率：\\\ |
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| 2. 放射性核素法 绝大多数外周血中T细胞通常处于细胞周期的G0期，当受刺激物刺激后，T细胞将从G0相进入G1相，并合成蛋白质、RNA和DNA等前体物质，为DNA复制准备物质基础，然后进入S期，细胞合成DNA量倍增，此时若在培养液中加入3H标记的DNA前体，即3H-胸腺嘧啶核苷，后者将掺入新合成的DNA中，其掺入的多少可由细胞内的放射强度表示出来，根据掺入的多少可推测细胞的增殖程度。\\ |
| __2. 放射性核素法__ \\ |
| 绝大多数外周血中T细胞通常处于细胞周期的G0期，当受刺激物刺激后，T细胞将从G0相进入G1相，并合成蛋白质、RNA和DNA等前体物质，为DNA复制准备物质基础，然后进入S期，细胞合成DNA量倍增，此时若在培养液中加入3H标记的DNA前体，即3H-胸腺嘧啶核苷，后者将掺入新合成的DNA中，其掺入的多少可由细胞内的放射强度表示出来，根据掺入的多少可推测细胞的增殖程度。\\ |
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| 3H-胸腺嘧啶核苷掺入法克服了形态法易受主观因素影响的缺点，结果判断客观，但该法所用的液体闪烁仪价格昂贵，并有放射性核素污染的潜在危险，使广泛使用受到限制。\\ |
| 3. MTT比色法 外周血淋巴细胞与PHA混合培养70h后，加入四甲基偶氮唑盐（MTT）混合后，再培养4-6小时，MTT在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用下，被还原成蓝黑色的MTT-甲，形成MTT-甲的量与细胞增殖程度呈正相关，故通过比色法测OD值，以刺激指数作为判断淋巴细胞转化率的指标。\\ |
| SI的计算公式：SI=试验孔OD均值/对照孔OD均值\\ |
| 3H-胸腺嘧啶核苷掺入法克服了形态法易受主观因素影响的缺点，结果判断客观，但该法所用的液体闪烁仪价格昂贵，并有放射性核素污染的潜在危险，使广泛使用受到限制。\\ |
| __3. MTT比色法__ \\ |
| 外周血淋巴细胞与PHA混合培养70h后，加入四甲基偶氮唑盐（MTT）混合后，再培养4-6小时，MTT在活细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶作用下，被还原成蓝黑色的MTT-甲，形成MTT-甲的量与细胞增殖程度呈正相关，故通过比色法测OD值，以刺激指数作为判断淋巴细胞转化率的指标。\\ |
| SI的计算公式：SI=试验孔OD均值/对照孔OD均值\\ |
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| 病人准备：\\ |
| 无特殊要求\\ |
| 标本采集和运送要求：\\ |
| 无特殊要求\\ |
| \\ |
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| %%tab-病人准备 |
| 无特殊要求\\ |
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| %%tab-标本采集和运送要求 |
| 无特殊要求\\ |
| /% |
| /% |
| [细胞免疫指标] |