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通过片段化,加接头并扩增得到可以测序的文库
通过片段化,加接头,乳液PCR扩增及纯化得到可以测序的文库
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质量合格的DNA,且含量大于5微克
DNA:基因组完整、无降解,电泳结果基因组DNA主带应在入-Hind III digest最大条带23kb左右,且主带清晰,无弥散;OD值260/280应在1.8~2.0之间:无蛋白质、RNA或肉眼可见杂质污染。 RNA:OD值260/280应在1.8~2.O之间,无肉眼可见污染;使用Agilent Bioanalyzer仪器检测,获得总RNA应28S:18S≥1,RIN≥7.5。 样品浓度:不低于100ng/uL。 DNA样品总量:每次样品制备需要大于3ug的样品。为保证实验质量及延续性,请一次性提供至少6ug的样品。如需多次制备样品,按照制备次数计算样品总量。 RNA样品总量:研究编码蛋白质:动物样品一次制备需10ug的总RNA,植物样品一次制备需15ug的总RNA;研究长链非编码RNA:无论动植物,请一次性提供30ug的高质量总RNA;研究小RNA:请一次性提供至少10ug高质量总RNA。 样品请置于1.5mL管中,做好标记,使用封口膜封好,DNA建议使用干冰或冰袋运输,RNA建议使用干冰运输,请勿反复冻融。
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