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| __项目介绍 ：__\\ |
| 载脂蛋白E(apo e)是调节含载脂蛋白B代谢的重要因素之一。apoE基因位于19号染色体，apoE的遗传多态主要由位于同一基因位点上的3个等位基因(ε2、ε3、ε4)所控制，分别编码血浆中3种异构体，构成6种不同的基因型，3种纯合子(ε2/ε2、ε3/ε3、ε4/ε4)，3种杂合子(ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε4)。\\ |
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| 血浆表现型以等显型形式遗传为E2/E2，E3/E3，E4/E4，E2/E3，E3/E4。ApoEε3/ε3是正常的基因型（62%），与心血管病无明显联系。ApoEε4与动脉粥样硬化的风险增加有关。当饱和脂肪饮食过高时，这些患者将出现LDL-C过度升高，而携带ApoEε2亚型的患者倾向于较低的LDL-C，携带ApoEε2和ApoEε4的患者都伴有甘油三酯升高。\\ |
| \\__有何用途 ：__\\ |
| __心血管病（caidiovascular disease，CVD）：__\\ |
| ApoE基因分型有时是作为胆固醇和甘油三酯升高时随访实验的一部分，用于检查并帮助确定在脂类异常时遗传因素所起的作用。它并没有得到广泛应用，但是当其被申请时需与其他试验如脂蛋白电泳等联合使用。胆固醇和甘油三酯升高的病例，通常考虑选择他汀类药物作为心血管病的治疗。然而，在部分敏感的个体中由于其对降脂药物反应的广泛不同，他汀类药物并不能给予充分的治疗，部分原因是由于ApoE基因型的影响。遗传的变异性影响血浆脂蛋白浓度对治疗的反应性，这可被用于个体化饮食推荐的依据。尽管对低脂饮食有适当的反应，但携带ApoEε4的个体对他汀类药物的相应的降脂效果却不如携带ApoEε2的个体。就此而言，ApoE基因分型能够推到CVD个体化药物疗效治疗决策制订。\\ |
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| __阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）：__\\ |
| ApoE基因分型有时作为附加检测，有助于对有症状成年人可能的晚期AD的诊断。它被称为敏感性或风险因素检测，是因为该实验是预测是否有增加AD的患病风险，而不是对AD的明确诊断。因此，如果患者患有痴呆，ApoEε4的存在增加了AD引起痴呆的可能性。尚无确定性的试验对AD进行诊断。然而，内科医生可以通过排除引起痴呆的其他潜在因素，同时结合AD的遗传倾向，对AD做出合理、准确的临床诊断。\\ |
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| %%tab-影响因素 |
| 一、项目介绍\\ |
| 载脂蛋白E(apo e)是调节含载脂蛋白B代谢的重要因素之一。apoE基因位于19号染色体，apoE的遗传多态主要由位于同一基因位点上的3个等位基因(ε2、ε3、ε4)所控制，分别编码血浆中3种异构体，构成6种不同的基因型，3种纯合子(ε2/ε2、ε3/ε3、ε4/ε4)，3种杂合子(ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε4)。血浆表现型以等显型形式遗传为E2/E2，E3/E3，E4/E4，E2/E3，E3/E4。 \\ |
| ApoEε3/ε3是正常的基因型（62%），与心血管病无明显联系。ApoEε4与动脉粥样硬化的风险增加有关。当饱和脂肪饮食过高时，这些患者将出现LDL-C过度升高，而携带ApoEε2亚型的患者倾向于较低的LDL-C，携带ApoEε2和ApoEε4的患者都伴有甘油三酯升高。\\ |
| 二、方法学评价\\ |
| 对apoE分型以聚合酶链反应，限制性片段长度多态性(简称PCR-RFLP)方法为主. 以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法进行载脂蛋白E基因型分型，具有清晰、简便、快速等优点。apoE多态性的分子基础是112位点上半胱氨酸TGC(Cys)和158位点上精氨酸CGC(Arg)的互换，其DNA序列分别是TGC(Cys)和CGC(Arg)，apoE2均为Cys［(G)TGC］，而apo e3 112位是Cys［(G)］，158位是Arg［(G)CGC］，apoE4中二点为Arg［(G)CGC］。由于限制性内切酶HhaⅠ特异性地识别GCGC序列，故HhaⅠ酶可以识别Arg位点DNA序列(前面也有一个G)，而不能识别Cys位点DNA序列(前面也有一个G)。apoE基因PCR-RFLP原理为用特异性引物扩增，包括2位点DNA序列，扩增产物(246 bp)进一步用HhaⅠ酶切，由于ε2、ε3、ε4的2位点GCGC(Cys)-GTGC(Arg)差异，产生不同的限制性片断长度多态性ε2、ε3、ε4。\\ |
| 应用聚丙烯酰胺分离经HhaⅠ酶消化的片段，虽然分辨效果好，但是试剂毒性大，制备凝胶过程复杂。\\ |
| 分离DNA片断时，由于其分子量小(40～100 bp)，应用普通琼脂糖分离效果不佳。而应用Sigma公司的琼脂糖，配置为4%的浓度，酶切后的PCR产物片段分辨甚佳。\\ |
| 有何用途：\\ |
| 心血管病（caidiovascular disease，CVD）：\\ |
| ApoE基因分型有时是作为胆固醇和甘油三酯升高时随访实验的一部分，用于检查并帮助确定在脂类异常时遗传因素所起的作用。它并没有得到广泛应用，但是当其被申请时需与其他试验如脂蛋白电泳等联合使用。\\ |
| 胆固醇和甘油三酯升高的病例，通常考虑选择他汀类药物作为心血管病的治疗。然而，在部分敏感的个体中由于其对降脂药物反应的广泛不同，他汀类药物并不能给予充分的治疗，部分原因是由于ApoE基因型的影响。遗传的变异性影响血浆脂蛋白浓度对治疗的反应性，这可被用于个体化饮食推荐的依据。尽管对低脂饮食有适当的反应，但携带ApoEε4的个体对他汀类药物的相应的降脂效果却不如携带ApoEε2的个体。就此而言，ApoE基因分型能够推到CVD个体化药物疗效治疗决策制订。\\ |
| 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）：\\ |
| ApoE基因分型有时作为附加检测，有助于对有症状成年人可能的晚期AD的诊断。它被称为敏感性或风险因素检测，是因为该实验是预测是否有增加AD的患病风险，而不是对AD的明确诊断。因此，如果患者患有痴呆，ApoEε4的存在增加了AD引起痴呆的可能性。尚无确定性的试验对AD进行诊断。然而，内科医生可以通过排除引起痴呆的其他潜在因素，同时结合AD的遗传倾向，对AD做出合理、准确的临床诊断。\\ |
| 病人准备：\\ |
| 采血前2～3天尽可能少食含脂类食物，应该保持正常的生活状态，以使身体处于一个稳定的代谢水平;抽血前空腹十二小时以上。\\ |
| 标本采集和运送要求：\\ |
| 在病人安静状态下静脉采血2-3ml，采集后注入抗凝管，并尽快送往化验室。\\ |
| %%tab-方法学评价 |
| 对apoE分型以聚合酶链反应，限制性片段长度多态性(简称PCR-RFLP)方法为主. 以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法进行载脂蛋白E基因型分型，具有清晰、简便、快速等优点。apoE多态性的分子基础是112位点上半胱氨酸TGC(Cys)和158位点上精氨酸CGC(Arg)的互换，其DNA序列分别是TGC(Cys)和CGC(Arg)，apoE2均为Cys［(G)TGC］，而apo e3 112位是Cys［(G)］，158位是Arg［(G)CGC］，apoE4中二点为Arg［(G)CGC］。由于限制性内切酶HhaⅠ特异性地识别GCGC序列，故HhaⅠ酶可以识别Arg位点DNA序列(前面也有一个G)，而不能识别Cys位点DNA序列(前面也有一个G)。\\ |
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| apoE基因PCR-RFLP原理为用特异性引物扩增，包括2位点DNA序列，扩增产物(246 bp)进一步用HhaⅠ酶切，由于ε2、ε3、ε4的2位点GCGC(Cys)-GTGC(Arg)差异，产生不同的限制性片断长度多态性ε2、ε3、ε4。应用聚丙烯酰胺分离经HhaⅠ酶消化的片段，虽然分辨效果好，但是试剂毒性大，制备凝胶过程复杂。分离DNA片断时，由于其分子量小(40～100 bp)，应用普通琼脂糖分离效果不佳。而应用Sigma公司的琼脂糖，配置为4%的浓度，酶切后的PCR产物片段分辨甚佳。\\ |
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| %%tab-病人准备 |
| 采血前2～3天尽可能少食含脂类食物，应该保持正常的生活状态，以使身体处于一个稳定的代谢水平；抽血前空腹十二小时以上。\\ |
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| %%tab-标本采集和运送要求 |
| 在病人安静状态下静脉采血2-3ml，采集后注入抗凝管，并尽快送往化验室。\\ |
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