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__项目介绍 :__\\ |
骨型碱性磷酸酶来源于成骨细胞,是成骨细胞代谢活跃的特异性指标,与骨形成相关,不受血中其它来源的碱性磷酸酶(ALP)影响。NBAP 是成骨细胞分泌的一种糖蛋白,分子量约为12000道尔顿。该酶在细胞内合成时新生的酶蛋白先在内质网糖基化,再通过高尔基体转运到细胞膜表面,通过多糖链与磷酯酰肌醇相连嵌合到细胞膜的外浆膜。在多糖-肌醇磷酸特异水解酶的作用下,骨型碱性磷酸酶能被释放到血循环中。骨型碱性磷酸酶在机体的生理功用主要是在成骨过程中水解磷酸酯,为羟磷灰石的沉积提供必须的磷酸;同时,水解焦磷酸盐,解除其对骨盐形成的抑制作用,有利于成骨过程。\\ |
NBAP测定常为用于各种原因所致骨质疏松症(如绝经后妇女骨质疏松症等)、变形性骨炎,骨软化症、肾性骨营养不良、原发性甲状旁腺功能亢进、骨转移性癌及骨折愈合期等疾病监测及诊断的有效指标,亦可用于佝偻病、儿童缺钙治疗的监测指标。\\ |
生物变异\\ |
生理变异:6.2%\\ |
人群变异:35.6%\\ |
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1.用于亚临床佝偻病、骨代谢障碍及高转化骨质疏松的诊断。\\ |
2.指导补钙或维生素D治疗:易患低钙人群或疾病主要包括儿童、孕产妇、老年人、佝偻病、骨质疏松、肝肾甲状腺疾病等,当人体缺钙或维生素D时,血钙下降,甲状旁腺激素分泌,促进肾脏合成大量1,25(OH)2维生素D3生成,后者可使静止的成骨细胞转化成活跃的成骨细胞,合成大量的BALP释放入血,BALP活性与活性成骨细胞的数量成正比,是反映成骨细胞活性和数量的专一标志物。补钙或维生素D治疗后4周后复查BALP,发现BALP活性无变化应更换钙剂和避免长期服用导致的维生素D中毒。\\ |
3.BALP活性的检测以及动态观察可为骨代谢异常疾病早诊、疗效监测、病情预后等提供有效依据:骨密度的改变太慢不能作为临床监测骨代谢异常疾病(骨质疏松、骨软化症、佝偻病、Paget病、早期甲亢、慢性肾衰、肾移植病人等)治疗效果的早期反应。BALP参与成骨过程并且其活性在血清中稳定没有昼夜变化,因此可作为观察骨形成变化率,为临床提供有效治疗的监测手段。\\ |
4.生长激素缺乏的儿童,使用生长激素后生长速率加速,BALP活性增加,并且与生长激素治疗所诱导的高SD分数正相关,能有效地监测对生长激素治疗的反应性。\\ |
5.慢性肾功能衰竭病人在接受肾移植后,常发生持续性的甲状旁腺机能亢进,BALP活力与甲状旁腺激素呈明显正相关,与骨皮质的密度呈负相关。\\ |
1.用于亚临床佝偻病、骨代谢障碍及高转化骨质疏松的诊断。\\ |
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2.指导补钙或维生素D治疗:易患低钙人群或疾病主要包括儿童、孕产妇、老年人、佝偻病、骨质疏松、肝肾甲状腺疾病等,当人体缺钙或维生素D时,血钙下降,甲状旁腺激素分泌,促进肾脏合成大量1,25(OH)2维生素D3生成,后者可使静止的成骨细胞转化成活跃的成骨细胞,合成大量的BALP释放入血,BALP活性与活性成骨细胞的数量成正比,是反映成骨细胞活性和数量的专一标志物。补钙或维生素D治疗后4周后复查BALP,发现BALP活性无变化应更换钙剂和避免长期服用导致的维生素D中毒。\\ |
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3.BALP活性的检测以及动态观察可为骨代谢异常疾病早诊、疗效监测、病情预后等提供有效依据:骨密度的改变太慢不能作为临床监测骨代谢异常疾病(骨质疏松、骨软化症、佝偻病、Paget病、早期甲亢、慢性肾衰、肾移植病人等)治疗效果的早期反应。BALP参与成骨过程并且其活性在血清中稳定没有昼夜变化,因此可作为观察骨形成变化率,为临床提供有效治疗的监测手段。\\ |
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4.生长激素缺乏的儿童,使用生长激素后生长速率加速,BALP活性增加,并且与生长激素治疗所诱导的高SD分数正相关,能有效地监测对生长激素治疗的反应性。\\ |
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5.慢性肾功能衰竭病人在接受肾移植后,常发生持续性的甲状旁腺机能亢进,BALP活力与甲状旁腺激素呈明显正相关,与骨皮质的密度呈负相关。\\ |
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小儿≤200U/L孕产妇≤150U/L更年期妇女≤100U/L\\ |
小儿≤200U/L\\ |
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孕产妇≤150U/L\\ |
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更年期妇女≤100U/L\\ |
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正常 ≤200 U/L ; \\ |
VD缺乏状态 >200-250 U/L ; \\ |
正常 ≤200 U/L \\ |
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VD缺乏状态 >200-250 U/L \\ |
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%%tab-影响因素 |
一、项目介绍\\ |
骨型碱性磷酸酶来源于成骨细胞,是成骨细胞代谢活跃的特异性指标,与骨形成相关,不受血中其它来源的碱性磷酸酶(ALP)影响。NBAP 是成骨细胞分泌的一种糖蛋白,分子量约为12000道尔顿。该酶在细胞内合成时新生的酶蛋白先在内质网糖基化,再通过高尔基体转运到细胞膜表面,通过多糖链与磷酯酰肌醇相连嵌合到细胞膜的外浆膜。在多糖-肌醇磷酸特异水解酶的作用下,骨型碱性磷酸酶能被释放到血循环中。骨型碱性磷酸酶在机体的生理功用主要是在成骨过程中水解磷酸酯,为羟磷灰石的沉积提供必须的磷酸;同时,水解焦磷酸盐,解除其对骨盐形成的抑制作用,有利于成骨过程。\\ |
NBAP测定常为用于各种原因所致骨质疏松症(如绝经后妇女骨质疏松症等)、变形性骨炎,骨软化症、肾性骨营养不良、原发性甲状旁腺功能亢进、骨转移性癌及骨折愈合期等疾病监测及诊断的有效指标,亦可用于佝偻病、儿童缺钙治疗的监测指标。\\ |
生物变异\\ |
生理变异:6.2%\\ |
人群变异:35.6%\\ |
二、方法学评价\\ |
目前鉴别和定量测定骨型碱性磷酸酶的方法可以分为两大类:电泳法和非电泳法。\\ |
电泳法主要利不同的同工酶之间物理性状、分子大小及荷电量的不同而进行。根据所用的支持特和操作的方法可分为:醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和亲和电泳等。其中以等电聚焦电泳和亲和电泳的分辨效果较好。等电聚焦电泳分辨率高特别适合次级同工酶的分离。Sinaha等报告的一种固相pH梯度等电聚焦电泳以聚丙烯酰胺为载体,用两性电解质制成固定的pH梯度凝胶,避免了由于不稳定的pH梯度而引起的所谓“阴极漂移”现象。该法可将等电点准确到小数点后两位并把正常血清的10条酶带压缩在pH3.90~4.79范围。Rosalki等建立的亲和电泳法是利用麦胚植物血凝素(WGA)能特异地和骨型碱性磷酸酶结合形成WGA-骨型碱性磷酸酶复合物,该复合物在电场中不泳动或泳动很慢,从而将骨、肝型碱性磷酸酶清楚地分开。该方法简便,重复性好,骨型碱性磷酸酶的批内与批间CV分别为3.2%和5.2%。亲和电泳的分离效果与WGA的浓度有关,其最适浓度随电泳条件而异。因此,采用不同的电泳载体和不同的缓冲液时均应重新评价WGA的最适用量。\\ |
非电泳法有化学抑制法、热失活试验、亲和沉淀法和免疫分析法等。化学抑制法、热失活试验灵敏度和特异性较差。目前只用作鉴别某些病理血清碱性磷酸酶组织来源的过筛试验。亲和沉淀法和亲和电泳法一样利用麦胚植物血凝素的作用将骨型碱性磷酸酶和其他组织来源的碱性磷酸酶分开,然后测定骨型碱性磷酸酶的活性。该方法操作简便,有较好的灵敏度和特异性,但是当血清标本含有胆汁型碱性磷酸酶时,由于该酶也能和麦胚植物血凝素结合而使骨型碱性磷酸酶假性增高。近年建立的免疫分析法能把灵敏度、特异性、可靠及操作简便等特性很好地结合起来,从而满足了临床的常规应用。由Garnro等报道的放射免疫测定法测定的是骨型ALP的免疫活性蛋白而不是酶活力,并具有可以接受的特异性。而最近由Gomez等应用对骨型碱性磷酸酶特异很强的单克隆抗体建立的免疫分析法具有高度的敏感性和特异性,而且操作简便重复性好,被认为是目前鉴别和定量骨型ALP的最佳方法。\\ |
%%tab-方法学评价 |
目前鉴别和定量测定骨型碱性磷酸酶的方法可以分为两大类:电泳法和非电泳法。\\ |
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__电泳法__\\ |
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主要利不同的同工酶之间物理性状、分子大小及荷电量的不同而进行。根据所用的支持特和操作的方法可分为:醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳和亲和电泳等。其中以等电聚焦电泳和亲和电泳的分辨效果较好。等电聚焦电泳分辨率高特别适合次级同工酶的分离。Sinaha等报告的一种固相pH梯度等电聚焦电泳以聚丙烯酰胺为载体,用两性电解质制成固定的pH梯度凝胶,避免了由于不稳定的pH梯度而引起的所谓“阴极漂移”现象。该法可将等电点准确到小数点后两位并把正常血清的10条酶带压缩在pH3.90~4.79范围。Rosalki等建立的亲和电泳法是利用麦胚植物血凝素(WGA)能特异地和骨型碱性磷酸酶结合形成WGA-骨型碱性磷酸酶复合物,该复合物在电场中不泳动或泳动很慢,从而将骨、肝型碱性磷酸酶清楚地分开。该方法简便,重复性好,骨型碱性磷酸酶的批内与批间CV分别为3.2%和5.2%。亲和电泳的分离效果与WGA的浓度有关,其最适浓度随电泳条件而异。因此,采用不同的电泳载体和不同的缓冲液时均应重新评价WGA的最适用量。\\ |
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__非电泳法__\\ |
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有化学抑制法、热失活试验、亲和沉淀法和免疫分析法等。化学抑制法、热失活试验灵敏度和特异性较差。目前只用作鉴别某些病理血清碱性磷酸酶组织来源的过筛试验。亲和沉淀法和亲和电泳法一样利用麦胚植物血凝素的作用将骨型碱性磷酸酶和其他组织来源的碱性磷酸酶分开,然后测定骨型碱性磷酸酶的活性。该方法操作简便,有较好的灵敏度和特异性,但是当血清标本含有胆汁型碱性磷酸酶时,由于该酶也能和麦胚植物血凝素结合而使骨型碱性磷酸酶假性增高。近年建立的免疫分析法能把灵敏度、特异性、可靠及操作简便等特性很好地结合起来,从而满足了临床的常规应用。由Garnro等报道的放射免疫测定法测定的是骨型ALP的免疫活性蛋白而不是酶活力,并具有可以接受的特异性。而最近由Gomez等应用对骨型碱性磷酸酶特异很强的单克隆抗体建立的免疫分析法具有高度的敏感性和特异性,而且操作简便重复性好,被认为是目前鉴别和定量骨型ALP的最佳方法。\\ |
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%%tab-病人准备 |
抽血前的一周内应该保持正常的生活状态,以使身体处于一个稳定的代谢水平;采血前应使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,空腹十小时以上。\\ |
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%%tab-标本采集和运送要求 |
在病人安静状态下静脉采血2-3ml。\\ |
静脉采血:除非是卧床病人,一般取坐位采血。体位影响水分在血管内外的分布,干扰测定结果,故在采血前应静坐5min。一般自肘静脉采血,使用止血带的时间不超过1min,穿刺成功后应立即松开止血带。\\ |
抗凝剂选择:一般无需抗凝剂,用血清标本检测。\\ |
采集后注入试管中,防止剧烈震荡,并尽快送往化验室。\\ |
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病人准备:\\ |
抽血前的一周内应该保持正常的生活状态,以使身体处于一个稳定的代谢水平;采血前应使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动,空腹十小时以上。\\ |
标本采集和运送要求:\\ |
在病人安静状态下静脉采血2-3ml。\\ |
静脉采血:除非是卧床病人,一般取坐位采血。体位影响水分在血管内外的分布,干扰测定结果,故在采血前应静坐5min。一般自肘静脉采血,使用止血带的时间不超过1min,穿刺成功后应立即松开止血带。\\ |
抗凝剂选择:一般无需抗凝剂,用血清标本检测。\\ |
采集后注入试管中,防止剧烈震荡,并尽快送往化验室。\\ |
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