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  二、检测方法\\
  1.绵羊红细胞(sheep red blood cell,SRBC)自绵羊红细胞颈静脉无菌采血,注入放有玻璃珠的无菌干燥三角烧瓶中,轻轻旋摇15min,除去纤维蛋白。也可将羊血与等量或2倍量的阿氏(Alsever)液混合,既可抗凝,又适于储存。分装,4摄氏度保存,可用2-3周。实验前,取适量SRBC用生理盐水洗涤2次,第3次用缓冲液洗涤,离心弃去上清液,取比积红细胞用缓冲液配制SRBC悬液,加入20-30倍的稀释液中。在541nm波长处比浊,以吸光度为标准调整红细胞浓度。\\
  2.溶血素 溶血素(hemolysis)即抗绵羊红细胞抗体,是以SRBC作为抗原免疫家兔所得的兔抗血清,无需进不步提纯,但试验前应先行加热56摄氏度30min或60摄氏度3min以灭活补体。\\
  3.稀释缓冲液 磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验,ph调到7.2-7.4之间。另加适量NaCl以保持等渗,加适量活化补体必不可少的钙离子和镁离子。还可加入0.1%明胶以稳定蛋白溶液,加入0.02NaN3防腐,以利保存。\\
  4.50%溶血标准管 作CH50试验时,应同时配制50%溶血标准管。配制方法:取2%绵羊红细胞悬液0.5ml,加2.0ml蒸馏水,将SRBC全部溶解,再加入1.8%NaCl溶液2.0ml较正为等渗溶液,最后加入2%SRBC悬液0.5ml,即为50%溶血悬液,混匀后取此液2.5ml,随试验一起温育。\\
  5.取新鲜血清标本,在各管中加入血清与试剂,一并置37摄氏度水浴箱中温育30min。温育后各管2500r/min离心5min,仔细观察比较,选择溶血程度与标准管最为相近的两管,在分光光度计上分别读取OD541值,以最接近标准管OD值的一管定为最高有效反应管。按下列公式求50%溶血的总补体值。\\
  CH50(U/ml)=(1/血清用量)*稀释倍数\\
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  1.绵羊红细胞(sheep red blood cell,SRBC)自绵羊红细胞颈静脉无菌采血,注入放有玻璃珠的无菌干燥三角烧瓶中,轻轻旋摇15min,除去纤维蛋白。也可将羊血与等量或2倍量的阿氏(Alsever)液混合,既可抗凝,又适于储存。分装,4摄氏度保存,可用2-3周。实验前,取适量SRBC用生理盐水洗涤2次,第3次用缓冲液洗涤,离心弃去上清液,取比积红细胞用缓冲液配制SRBC悬液,加入20-30倍的稀释液中。在541nm波长处比浊,以吸光度为标准调整红细胞浓度。\\
  2.溶血素 溶血素(hemolysis)即抗绵羊红细胞抗体,是以SRBC作为抗原免疫家兔所得的兔抗血清,无需进不步提纯,但试验前应先行加热56摄氏度30min或60摄氏度3min以灭活补体。\\
  3.稀释缓冲液 磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验,ph调到7.2-7.4之间。另加适量NaCl以保持等渗,加适量活化补体必不可少的钙离子和镁离子。还可加入0.1%明胶以稳定蛋白溶液,加入0.02NaN3防腐,以利保存。\\
  4.50%溶血标准管 作CH50试验时,应同时配制50%溶血标准管。配制方法:取2%绵羊红细胞悬液0.5ml,加2.0ml蒸馏水,将SRBC全部溶解,再加入1.8%NaCl溶液2.0ml较正为等渗溶液,最后加入2%SRBC悬液0.5ml,即为50%溶血悬液,混匀后取此液2.5ml,随试验一起温育。\\
  5.取新鲜血清标本,在各管中加入血清与试剂,一并置37摄氏度水浴箱中温育30min。温育后各管2500r/min离心5min,仔细观察比较,选择溶血程度与标准管最为相近的两管,在分光光度计上分别读取OD541值,以最接近标准管OD值的一管定为最高有效反应管。按下列公式求50%溶血的总补体值。\\
  CH50(U/ml)=(1/血清用量)*稀释倍数\\
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8 04-Dec-2012 14:55 2.033 kB 1614216108 to previous 血.补体测定 ==> 血补体测定
7 04-Dec-2012 14:55 2.034 kB 1614216108 to previous | to last
6 16-Jul-2012 15:53 1.861 kB 1614216108 to previous | to last 补体测定 ==> 血.补体测定
5 16-Jul-2012 15:26 1.859 kB 1614216108 to previous | to last
4 04-May-2012 15:50 1.87 kB 1614216108 to previous | to last
3 23-Apr-2012 15:45 1.849 kB 1614216108 to previous | to last 血清总补体活性测定(CH50试验) ==> 血清总补体活性测定
2 23-Apr-2012 15:45 1.849 kB 1614216108 to previous | to last
1 13-Apr-2012 13:35 1.869 kB UnknownAuthor to last
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