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人TNFα试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人TNFα抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的羊抗人TNFα检测抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测，待测样品TNFα夹在捕获抗体和检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物，产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。TNFα的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。
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Bio-rad酶标仪
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灵敏度10pg/ml
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肿瘤坏死因子-α (TNFα)，是在急性炎症时由巨噬细胞或单核细胞产生的炎症细胞因子，对细胞内的各种信号事件负责，引起坏死或凋亡。 TNFα对实体瘤生长、进展和转移关键性的血管形成也很重要。此外TNFα同肥胖症联系在一起。它在肥胖啮齿类动物和人脂肪组织慢性升高，也许代表了肥胖和胰岛素抵抗之间的一个重要联系。在肥胖鼠和人 脂肪组织中的TNFa过渡表达。TNFα抑制胰岛素信号，至少部分是通过阻断胰岛素受体酪氨酸激酶活性和导致胰岛素受体基体1 (IRS-1)的丝氨酸磷酸化。然而还不清楚肥胖症期间由脂肪细胞产生的TNF-α的生理刺激物是什么，IRS-1在细胞TNF-α处理后如何抑止胰岛素受体酪氨酸激酶的活性。更好理解TNF-α和胰岛素信号通路之间的联系对发现肥胖症期间胰岛素抵抗状态的治疗是非常重要的。
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